贵州省波尔山羊胚胎移植试验报告 输出PDF 打印
编辑: 叶文剑    2011-07-27

70年代以来,胚胎工程在畜牧业中得到迅速发展和广泛应用,成为继人工受精、同期发情之后,本世纪最重要的家畜繁殖新技术。胚胎移植技术能充分发挥优良母畜在品种改良和育种中的作用,通过超数排卵和胚胎移植技术(MOET),可使其供体的繁殖后代增加7~10倍。贵州省畜禽品种改良站为了加快全省肉羊改良的进程,提高羊群整体生产水平,解决羊品种改良中优良种畜不足等问题。在有关部门的大力支持下,实施了《贵州省财政专项扶贫资金牛、羊胚胎移植项目》。与北京安伯公司的专家一起在德江县、沿河县、遵义县等贵州省的几个养羊大县进行了波尔山羊胚胎移植试验。现将结果报告于下,供同行参考。

1     材料与方法

1.1

(1)受体母羊:选自德江县、沿河县、遵义县的本地羊及杂交羊作为受体母羊。

(2)胚胎来源:波尔山羊冻胚来源于加拿大太平洋遗传育种中心;鲜胚来源于贵州铜仁德江宏海波尔山羊场。

(3)主要药品:PBS液、阴道栓、FSH来源于新西兰;利多卡因、兽用维生素A D E注射液来源于中国农科院畜牧研究所;速眠新、特制苏醒灵3号来源于长春兽医研究所;氯前列烯醇来源于上海市计划生育科学研究所。

(4)主要器械:体视显微镜、内窥镜、微量加样器、培养皿、手术器械等。

(5)耗材:75%酒精、5%碘酊、生理盐水、林可霉素、纱布、脱脂棉、80IU青霉素、100IU链霉素。

1.2

(1)供、受体羊准备。供体母羊通常选择遗传价值高的优良个体,供体母羊必须发情周期正常,有过产羔和情期记录,每次妊娠不超过2次配种,无难产或生殖机能和遗传疾病;体况健康和营养状况良好。受体母羊通常选择16~18月龄或2~6岁的经产本地羊或低代杂交母羊,健康,膘情中等且无繁殖疾病的。在移植前2个发情期内观察母羊的正常发情情况,作好记录。在移植前2个月打上耳号、做好防疫和驱虫工作。在移植前1个月对供体和受体羊进行催情,平均每只每天补饲肉羊配合饲料0.55kg(由贵州省畜禽品种改良站统一提供),同时给予清洁的饮水和足够的青干草料。同期发情处理受体母羊发情的天数与供体母羊前后不超过12h

(2)供体、受体羊同期发情处理。见表1,表2

1 供体羊同期发情处理日程表

 

日期

 

供体羊处理

 

方法1

 

上午                                 下午                   

 

 

方法2

 

上午                     下午

 

0

 

全天放CIDR 注射维生A-D-E 3 mL 1

 

注射维生素A-D-E 3 mL  FSH 2 mL      FSH 1 mL

 

FSH 1 mL                            FSH 1 mL                                  

 

FSH 1 mL                            FSH 1 mL

 

FSH 1 mL                            FSH 1 mL

 

发情配种

 

禁食

 

全天禁食、紧水

 

冲胚

 

全天放CIDR 注射维生A-D-E 3 mL 1

 

注射维生A-D-E 3 mL  FSH 1 mL       FSH 1 mL

 

FSH 1 mL                            FSH 1 mL

 

FSH 1 mL                            FSH 1 mL

 

FSH 1 mL                            FSH 1 mL

 

发情配种

 

禁食

 

全天禁食、禁水

 

冲胚

 

12

 

13

 

14

 

15

 

16

 

21

 

22

 

23

 

 

 

2  受体羊同期发情处理日程表

日期

受体羊处理

0

13

15

16

21

22

23

放海绵栓, 注射维生素A-D-E 3 mL

注射维生素A-D-E 3 m L

上午:PMSG 180 IU,抽海绵栓

观察发情

下午禁食

全天禁食禁水

移植

 

本次试验对16只纯种波尔山羊供体进行处理(其中,7只采用方法1进行处理,9只用方法2进行处理),处理方法见表1。共对398只受体母羊进行处理,处理方法见表2

(3)冲胚及胚胎移植。#胚胎回收和处理。主要采用外科手术法。处理前24h禁水、36h禁食,手术前5~10min全身麻醉(麻醉方法:颈静脉注射静松灵0.4mL)。前底后高仰卧保定在手术床上,按常规方法在乳房下部距腹中线3cm,沿腹中线切开皮肤10cm,钝器拨开肌肉,剪开腹膜,拉出子宫、输卵管、卵巢,观察记录黄体数。先在一侧子宫中部大弯处用止血钳尖端刺透子宫壁,插入冲卵管,向导管气囊打气3~5mL。在导管顶端前方,向宫管结合部插入导管针,抽出针芯,由此向宫腔缓慢注入冲胚液20mL左右,冲胚液边注入边由导管排出,用培养皿接收,最后用手指轻轻挤压子宫角,让冲胚液完全排出,用同样的方法冲洗另一侧子宫角。将回收的胚胎于集卵皿内静置数分钟,于体视显微镜下检胚。冲胚后子宫壁缝合,将子宫送回原处,腹腔内注入0.9%生理盐水400mL左右,创口处抹上80IU青霉素约1瓶,缝合创口,1015日后创口拆线。胚胎移植。一般选择与供体母羊同期发情%12h的受体母羊进行胚胎移植。将不同部位采集的胚胎对应移植到受体黄体侧的子宫角或输卵管,根据卵巢上黄体数量,每次移植1~3枚,或在两侧各移植1枚。其手术方法同供体母羊采胚法。术后加强护理,10~15日后创口拆线。

2     试验效果

2.1胚胎回收效果

通过方法1处理的7只供体羊回收胚胎195枚,可用胚胎为163枚,平均27枚;方法2处理的9只供体羊回收胚胎113枚,可用胚胎为95枚,平均10.5枚。

2.2 受体羊移植妊娠结果

本次试验一共同期发情处理398只本地羊及杂交羊,对发情的351只进行了胚胎移植(其中:鲜胚移植122只,冻胚移植229)60d后妊娠检查,结果共妊娠208(其中:鲜胚移植妊娠83只,移植妊娠率达68%;冻胚移植妊娠125只,移植妊娠率达55%)。共产羔234(其中:鲜胚移植产羔104只,产羔率达85%;冻胚移植产羔130只,产羔率达57%)

3 讨论与小结

(1)本试验同期发情处理效果比较好,发情率高,但黄体的形成率不是很高,做同期发情处理和胚胎移植的受体羊,一侧或两侧卵巢中必须有黄体存在。在试验中发现,黄体形成主要与羊的膘情、羔羊哺乳和气候有直接关系,膘情正常、断奶较早的羊,黄体合格率较高。

(2)冲胚效果比较,采用方法1比方法2平均多17枚,差异极显著。两种处理方法不同点在于,第1种方法在第12天上午比第1种方法多注射1mLFSH,其它处理方法完全一样。处理方法的稳定性,待进一步证实。

(3)从本试验看,鲜胚移植比冻配移植妊娠率高13%,有条件的地方开展鲜胚移植,可大大提高经济效益。

(4)胚胎移植技术是代替活畜引进,利用当地羊或杂交羊繁殖纯种羊,缩短羊改周期,提高羊的生产性能,是便于推广的一项既经济又安全的实用技术。但此项技术目前不可能像人工授精一样大面积推广,原因主要是前期费用大,技术含量高,操作繁琐,每个环节必须无菌操作,移植过程中要严格要求,否则就影响妊娠率,建议有条件的地区在引进良种羊的同时,积极开展此项技术的引进和推广工作。

本文摘自焦仁刚的《贵州省波尔山羊胚胎移植试验报告》一文,在此表示感谢!


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