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| 辽宁绒山羊胚胎移植 |
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| 编辑： 叶文剑 2011-07-27 | |
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1.胚胎体内生产技术 主要涉及供体母羊的超数排卵、供体母羊腹腔镜输精配种、胚胎回收和质量鉴定、胚胎冷冻保存、冻胚腹腔镜移植技术、受体母羊同期发情技术。 首先应对提供胚胎的供体母羊进行选择并对选出的供体母羊加强饲养管理。供体母羊应符合品种及品系标准，生产性能良好遗传性能稳定，谱系清楚，无遗传缺陷体质健康，无生殖器官疾病，繁殖机能正常经产，年龄为1.5~5岁；产羔母羊应断奶1个月以上。对选出的供体母羊统一编号，打耳号，便于管理。根据辽宁绒山羊核心群母羊全舍饲饲养管理特点，以及胚胎体内生产技术实施中需要相对集中饲养的特点，对选择的供体母羊，加强饲养管理，保持饲养环境稳定，避免应激反应。保持饲养环境卫生、干燥，圈舍温度适宜。制定合理的日粮配方，胚胎移植前短期优饲，尤其应加强蛋白质营养，保持良好的营养状况，体况中上等。满足供体羊清洁饮水需要，准确掌握供体母羊的发情周期。 对于在超排前已连续观察到2~3个发情周期的自然发情母羊，在发情周期阴道放置羊CIDR栓预处理，预处理的第9天换栓，开始采用FSH+PG法进行超数排卵处理。FSH+PG法超排处理的具体方法是:用FSH包装盒内所附稀释剂或用生理盐水溶解FSH，预处理的每天上午7:00~8:00和晚19:00~20:00各注射1次，连续4天共注射8次，每次1毫升。在第5次注射的同时，注射氯前列烯醇2毫升；预处理的第12天，第6次注射，并撤除CIDR阴道栓。第8次注射FSH后，先试情，发情的立即肌注促排3号，然后进入配种程序。 供体母羊超排注射程序完成后，每隔8小时观察发情或用试情公羊试情，以母羊站立接受试情公羊爬跨作为发情鉴定的标准，发情后进入配种程序。供体母羊的配种公羊为超排母羊的选配公羊，要求生产性能良好，遗传性能稳定，谱系清楚，无遗传缺陷，体质健康，无生殖器官疾病，繁殖机能正常，达到本品种或品系一级标准要求。供体羊发情后8小时进行首次配种，或用大剂量精液进行人工授精，以后每8隔小时配种或人工授精1次，共计3~6次，至发情结束。也可用腹腔内窥镜进行子宫角输精，在发情8~10小时，两侧子宫角各输精0.2毫升。 供体母羊腹腔镜冷冻精液输精配种，对冷冻胚胎生产和针对辽宁绒山羊饲养场户的鲜胚移植都具有十分重要的意义。在供体母羊发情后，禁食禁水。发情后8~10小时应用腹腔镜冷冻精液输精一次，且卵受精率很高。输精时采用特制羊用手术保定架，羊麻醉后在术部左侧乳房前8~10厘米处，用手术刀将皮肤切开2厘米的口，用套管针刺入腹腔，调整手术架角度，使内脏前移，并使腹壁与内脏分离。如果母羊过肥，可用腹腔镜自带的气腹机孔，向腹腔内注入空气，使网膜脂肪和内脏前移，腹壁与内脏分离，使子宫暴露出来。从刺入的套管针中，将腹腔内窥镜伸入腹腔，在右侧相同部位，用同样的方法将穿刺针穿入，然后将子宫钳从右侧创口伸进，打开腹腔镜光源后，双手配合观察子宫角及排卵点情况，做好卵巢情况观察记录。将细管冷冻精液解冻后，抽入毫升注射器中，用子宫钳将子宫角牵引至创口处，用1毫升注射器将精液缓慢注入子宫角。根据创口大小、出血情况，对创口进行处理。手术完的母羊臀部肌注消炎针，青霉素100万单位肌肉注射苏醒灵。对于未排卵的母羊，肌肉注射促排3号5微克。在供体母羊发情配种的6~6.5天，可进行子宫角胚胎回收。采用子宫角胚胎回收针，冲洗子宫角胚胎。将胚胎从回收冲卵液中检出后，对胚胎进行净化处理，并进行形态学质量鉴定和分级。辽宁绒山羊的发育胚胎分为A、B、C、D四个等级。A级优质胚胎，胚胎发育阶段与胚龄一致，卵裂球大小、颜色、结构一致，联系紧密，形成均匀的球形体，透光度适中，细胞界限明显，透明带圆而平滑。B级胚胎发育阶段与胚龄基本一致，大部分卵裂球大小、颜色、结构一致，联系紧密，形成均匀球形体，少数卵裂球与细胞团联系不紧密，透光度适中，细胞界限明显，透明带圆而平滑。C级胚胎发育阶段与胚龄不太一致，或部分卵裂球(<50%)变性，与细胞团联系不紧密，部分细胞界限不清，结构较松散。D级透明带变形或破裂，内细胞团变暗，卵裂球界限不清或卵裂球变性，卵裂球间隙增大，发育明显迟缓。一般选择A、B级胚胎进行鲜胚移植，进行冷冻保存时则选择A级胚胎。首次超排效果好的供体母羊可进行重复超排。本繁殖季节内进行重复超排时，应与上次超排间隔2~3个发情周期。第一次超排效果不好的母羊和个别手术出血较多的供体母羊，不宜进行重复超排。在一个繁殖季节超排的供体，可超排后配种产羔，以使其生殖系统尽快恢复。如在下一个及以后的繁殖周期内进行重复超排时，不再安排无胚胎移植后代或胚胎移植妊娠率较低的胚胎供体进行超排。 2.胚胎冷冻保存技术与冻胚 远距离运输 选择子宫角回收的A级桑堪胚或早期囊胚进行冷冻保存。胚胎冷冻前，在室温下20~22℃将胚胎移入冷冻保护液内，脱水平衡5~10分钟后，将胚胎装入冷冻细管，每管装入胚胎2~3枚。装管后将细管热封，或用细管塞封口，并用液体浸透棉塞端，进行棉塞端密封。作好细管标签，标明日期、品种、羊号、细管号及胚胎数量、等级、发育阶段等简单识别信息，填入记录。胚胎冷冻保护液可购买市售胚胎冷冻液。 将胚胎细管放入20℃冷冻室里，启动冷冻程序。冷冻程序为20℃至-6.5℃，降温速度1℃/分钟；-6.5℃人工诱发结晶，待整段结晶后将细管迅速放回冷冻室，并在诱发结晶温度平衡10分钟；-6.5℃至-35℃，降温速度0.3℃/分钟，降温至-35℃时，将胚胎细管装入细管套，投入液氮保存。细管套应进行编号。 冷冻保存的胚胎，可进行简便廉价的远距离运输，从而代替活畜运输，有利于节约长距离活羊运输和检疫费用。还可减少因活畜运输而传播疾病的机会，以及长距离运输对活羊造成的运输应激，从而更加有力的促进品种推广和杂交利用。 3.冻胚移植技术 冷冻胚胎移植可在移植地观察到受体的发情日期后，在受体处于和胚龄相应的日期时，随时解冻移植，即受体发情后6~6.5天。解冻时将液氮中保存的胚胎细管取出，在室温下空气中停留15秒，之后投入35℃水浴，快速解冻10秒。将装有胚胎的细管用无菌纱布擦干，马上移植。利用腹腔镜观察受体子宫、卵巢的排卵及黄体发育情况，并做好记录。确定黄体级别，黄体直径在0.2~0.6厘米可移植。用子宫钳将黄体合格侧的子宫角牵引在至创口处，避开可见血管。用消毒过的回形针钝头刺破子宫角壁肌肉，注意不要刺穿子宫角，将解冻好的胚胎细管装入胚胎移植枪，枪头接胚胎移植针，将胚胎移植针从破口向子宫方向送入4厘米左右，缓缓持续推动移植枪推针，将胚胎送入子宫角。受体腹壁创口缝合一针，消毒。每天注射青链霉素，连续2天，防治创口感染。利用腹腔镜移植胚胎，对受体羊创伤小，操作过程简单，时间短，适于大规模移植，胚胎移植后妊娠产羔受体可重复利用。 本文摘自豆兴唐等《辽宁绒山羊胚胎移植》一文，在此表示感谢！ 相关信息: |
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