龙陵黄山羊胚胎移植试验 |
编辑: 吴诗 2011-12-01 | |
摘要:gk龙陵黄山羊的群体中选出20只供体和74只受体,分别用5.0 mg和6.0 mg国产FSH对供体羊进行超排处理。用阴道海绵栓+PMSG对受体羊进行同期发情处理,供体羊配种后第7天回收胚胎,按形态学将胚胎分级并对黄体记数,结果表明,5.O mg、6.O mg组黄体数分别为(11.90±0.32)枚、(9.80±0.69)枚,两组黄体数差异不显著;5.0 mg组的只均回收胚胎数为(7.40±0.34)枚,6.0 mg组为(4.50±1.24)枚,二者差异显著;把可用胚胎119枚移植给54只受体羊,移植产羔率为67%。 摘自《云南畜牧兽医2006年第2期》 龙陵黄山羊是云南省的地方优良品种之一,因其被毛黄色且产于龙陵县而得名,它具有抗逆性强、耐粗饲、繁殖力高、生长速度快、体型大、肉质鲜嫩、脂肪含量低、膻味小、屠宰率高等特点而深受当地人民喜爱,目前该品种羊在产地存栏仅30 000只左右,群体数量较小,良种及商品羊远远不能满足生产和市场的需要,急需提纯复壮该品种及扩繁优良高产群数量。为此,本试验通过对龙陵黄山羊同期发情、超数排卵及胚胎移植技术的研究,以期制订出龙陵黄山羊超数排卵和胚胎移植操作规程,从而加大该技术在龙陵黄山羊良种繁育中的应用。 1、地点及时间:实验于2001年3—4月在龙陵县种羊场进行。 2材料及方法 2.1供体羊的选择及饲养管理选择生产性能好、遗传稳定、系谱清楚、体质健壮、无生殖缺陷、无遗传和传染性疾病、年龄在2—5岁的龙陵黄山羊20只作为供体山羊。要求供体羊在优质牧草地上放牧,并补充高蛋白、维生素和矿物质,供给盐和清洁的饮水,保证正常的营养,并且供体山羊在采集胚胎前后保证良好的饲养管理条件,不任意变换草料和管理程序,保持饲养环境稳定,避免应激反应。 2.2受体羊的选择及饲养管理选择发情周期正常、空怀、健康、膘情七成以上、年龄2—6岁、无生殖缺陷的经产龙陵黄山羊母羊74只作为受体。受体羊必须单独组群加强饲养,保持环境相对稳定,避免应激反应,并对受体羊进行驱虫、预防注射、补饲适当精料。 2.3试剂氯前列烯醇(PG)O.2 rag/2 mL·支,上海市计划生育研究所生产。促卵泡素(FSH)10 mg/瓶,中科院动物研究所生产。Folligon(PMSG),新西兰产,冲卵液(PBS),自配。胚胎培养液,阴道海棉栓均为新西兰生产。 2.4供体羊超排处理用FSH—PG法进行超排处理。埋栓后第16天开始递减法肌肉注射FSH,总剂量为5.0和6.0 mg两组,连续3 d,每天早晚各注射1次,问隔12 h,第3天早上开始撤栓,撤栓后每只供体羊肌肉注射PG 2 mg,第2天早上试情配种,供体母羊发现发情后立即静脉注射LH 100 IU,每只供体羊配种2—3次。 2.5 同期发情处理受体羊与供体羊同期置人阴道海绵栓。受体羊与供体羊同时撤栓,受体羊撤栓时肌肉注射Folligon 200 IU。撤栓后第2天用试情公羊试情,每13早晚各试情1次,记录好发情13期和时间。 2.6胚胎的采集及移植 2.6.1 胚胎采集供体羊发情后第7天用手术法从子宫角回收胚胎。 2.6.2检胚根据胚胎形态,将胚胎分为A、B、C 3级,A、B级为可用胚胎,可单独移植。 A级:胚胎形态完整,轮廓清晰,呈球形,分裂球大小均匀,结构紧凑,色调和透明度适中,无附着的细胞和液泡。 B级:轮廓清晰,色调和细胞密度良好,可见到少量附着的细胞和液泡,变性细胞约占10%一30%。 C级:轮廓不清晰,色调发暗,结构较松散,游离的细胞和液泡较多,变性细胞约占30%一50%。 2.6.3移植方法用手术法进行胚胎移植,将胚胎移至黄体侧子宫角,选择供受体羊发情时间差在-1-12 h进行移植(超过4-24 h不能移植)。 2.7术后护理 术后供受体羊分开饲养,避免应激反应,地面要保持干燥,做好圈舍消毒,有条件时应垫上千草。术后要连续注射青霉素2~3 d,受体羊1—2个情期内要注意观察返情情况,若返情进行配种或移植。 2.8统计分析采用t检验对数据进行分析。 3试验结果 3.1受体羊同期发情结果受体羊74只,72 h内表现发情73只,同期发情率为98.6%。 3.2超数排卵结果见表1。
共超排处理20只龙陵黄山羊,于发情后第7天回收胚胎,有超排反应20只,超排反应率为100%。获胚胎总数207枚,共收集可用胚胎119枚。其中注射5.O mg和6.0 mg组平均黄体数分别为(11.90±0.32)枚、(9.80 4-0.69)枚,平均可用胚数分别为(7.40 4-0.34)枚、(4.50±1.24)枚。黄体数二者差异不明显(P>0.05),而回收可用胚胎数差异明显(P<0.05)。 3.3胚胎移植结果用手术法从子宫角移植受体54只羊,其中11只受体各移植3枚胚胎,43只受体各移植2枚胚胎,产羔36只,移植产羔率为67%。 4讨论 供体的超排结果不仅与羊只的体况有关,还与羊的品种和激素的用量有关,在一定范围内,外源FSH可促进卵巢中卵泡的发育成熟,但到达一定剂量后,超排效果并不随外源FSH量的增加而增加。反而使山羊卵巢表现异常反应。两组超排所回收的胚胎差异明显,是因为用0.6 mg FSH超排组有两只羊的黄体数少于3枚,未回收,同时还与回收率有关。 受体羊的同期发情与饲养管理有密切的关系,本次试验饲养管理不当,有的受体出现了偷配现象,而没有移植胚胎,另外一些受体卵巢上卵泡和黄体同时存在,降低了受体的可用率,仅为73.97%。受体母羊的移植胚胎数,1983年,Armstrong对山羊胚胎的研究发现,同一批胚胎移植2个胚胎的成活率(65%)高于移植1个(51%)胚胎的成活率。因此,本次龙陵黄山羊的胚胎移植由于胚胎充足,所以均移植2—3枚胚胎,有助于提高胚胎的成活率和增加受体母羊的妊娠率。另外该羊场气候环境较好,草料充足,对移植胚胎的受体精心管理,因而产羔率较高。
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